目的 建立雙光子顯微鏡下可視化膠質(zhì)瘤、壁細胞和血管的活體自發(fā)熒光的基因小鼠模型并進行 評價。
方法 以 ＰＤＧＦＲβ?Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６?ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ －基因工程小鼠為觀察壁細胞和血管結(jié)構(gòu)的載體，接種 ＧＬ２６１? ＣＦＰ 小鼠膠質(zhì)瘤細胞并對顱骨進行透明化，通過雙光子顯微鏡動態(tài)跟蹤觀察膠質(zhì)瘤增殖侵襲過程中血管與壁細胞 的動態(tài)變化。
結(jié)果 通過基因鑒定證實 ＰＤＧＦＲβ?Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６?ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ － 基因工程小鼠成功繁育。 對比 Ｃ５７ＢＬ／ ６ 小鼠，基因工程小鼠的形態(tài)外觀和繁殖等無顯著性差異，組織蘇木素?伊紅（ＨＥ）染色切片分析顯示臟器 發(fā)育無異常。 Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ 誘導(dǎo)下基因工程小鼠的 Ｃｒｅ 重組酶活性至第 ７ 天作用完全。 接種 ＧＬ２６１?ＣＦＰ 后觀察到膠 質(zhì)瘤增殖侵襲的動態(tài)過程及腫瘤內(nèi)血管形態(tài)結(jié)構(gòu)紊亂、游離壁細胞增多。
結(jié)論 成功構(gòu)建了熒光可視化壁細胞的 基因工程小鼠，分別利用異硫氰酸熒光素?葡聚糖標記血管和青色熒光標記腫瘤細胞，使用玻璃圓片與固定環(huán)替代 小鼠顱骨，實現(xiàn)了活體狀態(tài)下長期穩(wěn)定地動態(tài)跟蹤小鼠接種腦腫瘤后血管及血管支持細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，為研 究腦膠質(zhì)瘤提供了病理可視化的動物模型。
閱讀原文：雙光子顯微鏡技術(shù)下膠質(zhì)瘤?壁細胞在體多熒光示蹤小鼠模型的建立及應(yīng)用.pdf
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